液相电脑系统时间如何锁定,液相怎么设置自动关机

1.液相色谱分析的图谱怎么样修改？

2.液相色谱仪的使用步骤是什么？

3.请说明下液相色谱的原理以及操作时候的注意点

4.操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些？

5.高效液相色谱仪什么叫初始时间和日期

6.lc20at高效液相色谱图保留时间如何调出来

7.半胱氨酸为什么在液相系统中保留时间不固定

这种情况多是有两方面原因，一方面是你方法梯度等本身产生的峰，这一般是正常情况。另一方面是你溶解样品的溶剂有污染，或是你系统有污染。但，无论是哪种情况你都应该最先进一针新开瓶｛确保溶剂是干净的｝的色谱纯甲醇或乙腈来确认是不是也有这些峰存在，如果没有就是原来溶剂污染，如果还有峰就说明不是溶剂问题，极有可能是针座或是样品瓶，洗针溶剂等问题了。把这些都排除了，换新瓶，清洗针座，再进行空白。必要时，连续大进样量的溶剂数针，观察杂峰大小。如果还有峰，就只能更换色谱柱，用一个确保好用的色谱柱来排除。

液相色谱分析的图谱怎么样修改？

⑴温度控制不好，向前或向后单向漂移，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。

⑵流动相组成发生变化，向前或向后单向漂移，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。

⑶流动相未平衡好（如缓冲溶液或离子对试剂，尤其是低浓度的盐溶液），向前或向后单向漂移，需对柱子进行更长时间的平衡。

⑷泵或者管路中有气泡，前后漂移，可通过排气等将气泡赶出。

⑸泵单向阀中的宝石球磨损，造成流动相倒流，压力不稳定，保留时间前后漂移。解决办法是更换部件。

⑹泵比例阀控制失灵，不同流路流动相比例不断变化，保留时间前后漂移。解决方法是更换部件。

⑺泵活塞杆密封垫老化，流动相渗漏。解决办法是换密封垫。

⑻在线混合器混合能力变差，不接梯度测试混合能力，并同手工配置流动相比较。

⑼系统管路有堵塞，引起压力不稳，导致保留时间漂移。

⑽吸滤头堵塞，流动相抽取受阻。清洗或更换吸滤头。

⑾色谱柱样品超载，解决办法是减少进样量。

⑿色谱柱键合的固定相流失，注意流动相pH值在容许范围。

⒀硅胶填料的位点被活化，使用可修饰流动相，加三乙胺或使用碱灭活柱等。

液相色谱仪的使用步骤是什么？

修改操作方法如下：

1、将电脑系统时间调整至目的进样时间；

2、用N2000离线工作站打开需要修改的图谱；

3、如有需要，在此步骤可以对图谱信息（如实验人，单位、标题等等）进行修改；

4、保存文件，选择保存格式×××.dat；

5、用N2000离线工作站打开刚保存的×××.dat，再次保存，选择保存格式×××.mdy；

6、将×××.mdy文件后缀直接改成×××.org，完成。

如此产生的每一个图谱都有×××.dat和×××.org两个文件，符合系统采集时生成的图谱要求。

高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高。高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。

请说明下液相色谱的原理以及操作时候的注意点

目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。

范围：适用于Agilent1260HPLC。

责任：色谱检验工程师负责本规程执行。

内容：

1开机

1.1打开电脑。

1.2打开液相色谱各个模块的电源。

1.3双击桌面“仪器—联机”，进入联机界面。

1.4排气：

1.4.1手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。

1.4.2右键单击“泵”图标区域，选择“方法?”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。

1.4.3右键单击“泵”图标，点击“控制?”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

1.4.4右键单击“泵”图标，点击“方法?”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。

1.4.5右键单击“泵”图标，点击“方法?”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。

1.4.6同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法?”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制”选项，“ON”打开柱温箱和检测器。

2编辑方法

2.1点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法。

2.2选中除“数据分析”外的三项，进入下一选项卡。

2.3方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：Thisisfortest!）。进入下一选项卡。

2.4泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1.0ml/min，停止时间：如10min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。进入下一选项卡。

2.5自动进样器参数设定:选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。

2.6柱温箱参数设定:在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。进入下一选项卡。

2.7UV检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm。点击确定。

2.8在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。

2.9从“方法”菜单，选中“方法另存为?”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。

3单次采集

3.1从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，选择合适的路径，在“数据文件”中选择“前缀/计数器”，输入样品瓶的位置，点击“确定”。

3.2基线平稳后约10分钟，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。

4多次数据采集

4.1按照步骤2编辑完整方法。

4.2点击“序列”－“序列表”，输入“样品瓶”“样品名称”，“进样次数”，选择合适的“做样方法”

4.3点击“序列”－“序列参数”，选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议以选择“前缀/计数器”保存。

4.4从“序列”菜单，选中“序列另存为?”，输入一序列名，如“测试”，点击“确定。

4.5从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。

5数据分析（脱机状态使用）

5.1双击“仪器—脱机”图标进入的脱机画面。

5.2从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。

5.3从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名。点击“确定”，则数据被调出。（如预建立标准曲线，应先打开浓度较低的标样图谱。）

5.4做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“确定”。

6积分:

6.1从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”。点击，自动加载积分参数。

6.2点击左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件”。

6.3如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

7标准曲线

7.1点击“校正”－“校正设置”，输入“含量单位”。

7.2点击“校正”－“新建校正表”，点击确定。输入“化合物名称”和“含量”，点击“确定”，按照提示删除其他组分。

7.3至此完成单级校正，如要增加校正级别，应从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名（第二个标样），点击“校正”－“添加级别”，点击确定，输入“含量”，依次增加校正级别。

8打印报告

8.1从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变，点击“确定”。

8.2从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。

8.3点击“文件”－“另存为”－“方法”，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件”－“调用”－“方法”下，将该方法调出使用。（调用的方法中含有积分方法，标准曲线方法和打印报告方法）

9关机

9.1关机前，先关紫外灯，用相应的溶剂（甲醇或乙腈）充分冲洗系统大约30分钟。（色谱柱最终应保存在甲醇或乙腈中）

9.2退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。

9.3关闭Agilent1260各模块电源开关。

10其它注意事项

10.1当样品运行时，切勿打开自动进样器前遮盖，否则进样过程停止。

10.2系统发生漏液时，机器会检测到并停止进样，状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处，擦干漏液传感器，单击ON按钮，系统重新初始化。

10.3注意紫外灯使用寿命，切勿来回开关紫外灯。

操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些？

原理：

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9?107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

特点

1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～350×105Pa。

2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h 。

3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。

4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。

5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于 400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的 75% ～ 80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。 据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。

高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进行。

高效液相色谱法的主要类型及其分离原理

根据分离机制的不同，高效液相色谱法可分为下述几种主要类型：

1 ．液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)

流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于下式：

式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm--溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。

a. 正相液 — 液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。

b. 反相液 — 液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。

c. 液 — 液分配色谱法的缺点：尽管流动相与固定相的极性要求完全不同，但固定液在流动相中仍有微量溶解；流动相通过色谱柱时的机械冲击力，会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相（见后），可克服上述缺点。现在应用很广泛（70~80%）。

2 ．液 — 固色谱法

流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S），可表示如下：

Xm + nSa ====== Xa + nSm

式中：Xm--流动相中的溶质分子；Sa--固定相中的溶剂分子；Xa--固定相中的溶质分子；Sm--流动相中的溶剂分子。

当吸附竞争反应达平衡时：

K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]

式中：K为吸附平衡常数。[讨论：K越大，保留值越大。]

3 ．离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography)

IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。

以阴离子交换剂为例，其交换过程可表示如下：

X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) + Cl- (溶剂中)

当交换达平衡时：

KX=[-R4N+ X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-]

分配系数为：

DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX [-R4N+Cl-]/[Cl-]

[讨论：DX与保留值的关系]

凡是在溶剂中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法来进行分离。

4 ．离子对色谱法(Ion Pair Chromatography)

离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示：

X+水相 + Y-水相 === X+Y-有机相

式中：X+水相--流动相中待分离的有机离子（也可是阳离子）；Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对（如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等）；X+Y---形成的离子对化合物。

当达平衡时：

KXY = [X+Y-]有机相/[ X+]水相[Y-]水相

根据定义，分配系数为：

DX= [X+Y-]有机相/[ X+]水相= KXY [Y-]水相

[讨论：DX与保留值的关系]

离子对色谱法(特别是反相)发解决了以往难以分离的混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。

5 ．离子色谱法(Ion Chromatography)

用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器，为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。

以阴离子交换树脂（R-OH）作固定相，分离阴离子（如Br-）为例。当待测阴离子Br-随流动相（NaOH）进入色谱柱时，发生如下交换反应（洗脱反应为交换反应的逆过程）：

抑制柱上发生的反应：

R-H+ + Na+OH- === R-Na+ + H2O

R-H+ + Na+Br- === R-Na+ + H+Br-

可见，通过抑制柱将洗脱液转变成了电导值很小的水，消除了本底电导的影响；试样阴离子Br-则被转化成了相应的酸H+Br-，可用电导法灵敏的检测。

离子色谱法是溶液中阴离子分析的最佳方法。也可用于阳离子分析。

6 ．空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography)

空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离，而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后，随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻，因此就直接通过柱子，首先在色谱图上出现，一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中，这些组分在柱上的保留值最大，在色谱图上最后出现。

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、．分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。

1．进样系统

一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。

2．输液系统

该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。

3.分离系统

该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。

另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。

再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。

4．检测系统

高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。

（1）紫外检测器

该检测器适用于对紫外光（或可见光）有吸收性能样品的检测。其特点：使用面广（如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；灵敏度高（检测下限为10-10g／ml）；线性范围宽；对温度和流速变化不敏感；可检测梯度溶液洗脱的样品。

（2）示差折光检测器

凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但灵敏度低（检测下限为10-7g／ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。

（3）荧光检测器

凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物（如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等）的测定，其灵敏度很高（检测下限为10-12～10-14g／ml），痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。

（5）数据处理系统

该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

操作注意要点：

1)． 首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3)． 正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止) 。

4)． 一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，最重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5)． 同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6)． 样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7)． 关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8)． 填写登记本，由负责人签字。

注意事项：

1)． 流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

2)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

3)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤。

4)． 压力不能太大，最好不要超过150kgf/cm2 .

5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。

高效液相色谱仪什么叫初始时间和日期

影响液相色谱保留时间的因素：

1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水（90:10），如分离效果与保留时间延长，可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成，甲醇就可以换成乙腈，看具体的实际操作而定。

2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别，主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同，但保留时间一般不会相差太大，可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时，一般就调整到室温或者30度。

3、流速。流速的大小，液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。

4、进样量。进样量大，保留时间往往会延长。

5、输液系统的压力，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，保留时间将会缩短。

具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察，经过调整后才可以的到较好的色谱条件。

lc20at高效液相色谱图保留时间如何调出来

进行样品分析开始的时间和日期。

1、初始时间是指HPLC系统开始运行的时间点，在分析样品之前，HPLC系统需要进行一些初始化和平衡操作，以确保色谱柱和检测器等组件处于稳定的工作状态。日期是指进行样品分析的具体日期。在分析样品时，通常会记录下进行实验的日期，这样可以方便后续的数据分析和结果追溯。日期信息对于实验室记录和质量控制非常重要。

半胱氨酸为什么在液相系统中保留时间不固定

在保留的时间中。lc20at高效液相色谱图保留时间，是可以在这款色谱图中的保留时间中调出来的。LC-20AT高效液相色谱仪Prominence是高性价比的进口液相色谱仪具有分析效率高、网络化、高性能、自动化等特点。

1、样品制备不一致：半胱氨酸的保留时间受到样品制备的影响。如果样品制备过程中存在变异性，例如提取方法、洗脱条件等的差异，会导致保留时间不固定。

2、色谱柱性能变化：液相色谱柱的性能会随着使用时间的增加而变化，例如柱效、分离能力等可能会发生变化。这会导致半胱氨酸的保留时间不稳定。

3、流动相条件变化：流动相的组成和条件（pH、溶剂比例、流速等）会对半胱氨酸的保留时间产生影响。如果这些条件发生变化，保留时间会不稳定。

4、仪器条件变化：液相色谱仪器的条件（温度、压力等）也会影响半胱氨酸的保留时间。如果仪器条件发生变化，保留时间会不稳定。